2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（CAS号：2044-85-1），作为一种重要的生物化学探针，在生物学、医学以及毒理学研究中发挥着不可或缺的作用。这种化合物以其独特的物理化学性质和生物活性，成为测定细胞内活性氧（ROS）含量的有力工具，并广泛应用于细胞凋亡、细胞增殖及细胞毒性等复杂生物过程的研究中。

2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（CAS号：2044-85-1）物理化学性质

首先，让我们从2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯的基本物理化学性质入手。该化合物具有灰白色晶体粉末的外观，其分子式为C24H14Cl2O7，分子量达到485.27 g/mol。在标准大气压（760 mmHg）下，其沸点高达657.9°C，熔点则位于232-234°C之间。这些特性确保了该化合物在常规实验条件下的稳定性。此外，其密度为1.59 g/cm3，闪点为239.2°C，折射率为1.692，这些参数对于理解其在溶液中的行为及与其他分子的相互作用至关重要。

值得注意的是，2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯对光和水敏感，因此在储存时需要特别小心。建议将其密封储存在阴凉、干燥的库房中，避免阳光直射，远离腐蚀区，以确保其长期稳定性。

2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（CAS号：2044-85-1）生物活性与用途

作为一种细胞通透性荧光探针，2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（常简称为DCFH-DA）能够迅速渗透细胞膜，并在细胞内被酯酶水解为非荧光的二氯荧光素（DCFH）。随后，在细胞内ROS的作用下，DCFH被氧化成高度荧光的2′,7′-二氯荧光素（DCF），其激发/发射光谱为492/515nm，这一特性使得通过荧光显微镜或流式细胞仪等仪器轻松检测细胞内ROS水平成为可能。

2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（CAS号：2044-85-1）测定细胞内活性氧含量

细胞内ROS的生成与多种生理和病理过程密切相关，包括细胞信号传导、免疫反应、细胞凋亡等。因此，准确测定细胞内ROS水平对于理解这些过程至关重要。DCFH-DA的应用使得研究人员能够在不破坏细胞完整性的前提下，实时监测细胞内ROS的动态变化，从而揭示其在不同生物过程中的具体作用机制。

2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（CAS号：2044-85-1）细胞凋亡研究

细胞凋亡是细胞程序性死亡的一种形式，对于维持机体内环境稳定至关重要。研究表明，细胞凋亡过程中往往伴随着ROS水平的显著升高。通过DCFH-DA探针，研究人员可以直观地观察到细胞凋亡过程中ROS的时空变化，进而探讨其与细胞凋亡之间的内在联系。此外，结合其他凋亡相关指标的检测，可以进一步阐明细胞凋亡的分子机制。

2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（CAS号：2044-85-1）细胞增殖与细胞毒性评估

细胞增殖是生物体生长、发育和修复损伤的基础。而细胞毒性则是药物研发、环境污染物监测等领域需要重点关注的问题。DCFH-DA探针在评估细胞增殖和细胞毒性方面也显示出巨大的潜力。通过检测不同条件下细胞内ROS水平的变化，可以间接反映细胞增殖能力和对外部刺激的响应能力。同时，结合细胞存活率、细胞形态学变化等指标的综合分析，可以更加全面地评估药物或污染物的细胞毒性效应。

2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（CAS号：2044-85-1）实际应用案例

在药物研发领域，DCFH-DA探针被广泛应用于抗氧化剂、抗癌药物等的筛选和评估中。通过检测药物处理后细胞内ROS水平的变化，可以初步判断药物是否具有抗氧化或促氧化作用，进而评估其潜在的药理活性和安全性。此外，在环境科学研究中，DCFH-DA探针也被用于监测水体、土壤等环境介质中污染物的细胞毒性效应，为环境保护和污染治理提供科学依据。

结论

综上所述，2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯作为一种高效、灵敏的细胞通透性荧光探针，在生物学、医学及毒理学研究中具有广泛的应用前景。其独特的物理化学性质和生物活性使得研究人员能够方便地监测细胞内ROS水平的变化，进而深入探讨ROS在细胞凋亡、细胞增殖及细胞毒性等生物过程中的作用机制。随着研究的不断深入和技术的不断发展，相信DCFH-DA探针将在更多领域发挥重要作用，为人类的健康和环境保护事业贡献更多力量。